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怎么在液氮罐里儲存細(xì)胞呢?

時間:2020-05-21 09:22來源: 作者:ydgmve2020yyx 點(diǎn)擊:
怎么在液氮罐里儲存細(xì)胞呢?一般來講,凍存細(xì)胞的步驟會影響到細(xì)胞復(fù)蘇時的活力,所以在使用液氮罐儲存細(xì)胞時應(yīng)小心并按步驟操作: 自增壓液氮罐 1、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO +
怎么在液氮罐里儲存細(xì)胞呢?一般來講,凍存細(xì)胞的步驟會影響到細(xì)胞復(fù)蘇時的活力,所以在使用液氮罐儲存細(xì)胞時應(yīng)小心并按步驟操作:自增壓液氮罐

1、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷;

2、用胰酶對細(xì)胞進(jìn)行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);

3、再次用*培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化*的細(xì)胞中,用滴管輕輕吹打混勻。

4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期。

5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐*好;或者可以在4℃,2h;自增壓液氮罐
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